ഗ്രാം-സ്റ്റെയിനിംഗിലെ സ്റ്റെയിനിംഗ് റിജൻ്റ്സ്ൻ്റെ ശരിയായ ക്രമം എന്താണ്?
Aക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്, അൽകഹോൾ, അയോഡിൻ ലായനി, സഫ്രാനിൻ
Bക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്, അയോഡിൻ ലായനി, അൽകഹോൾ, സഫ്രാനിൻ
Cക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്, സഫ്രാനിൻ, അൽകഹോൾ, അയോഡിൻ ലായനി
Dഅയോഡിൻ ലായനി, ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്, അൽകഹോൾ, സഫ്രാനിൻ
Answer:
B. ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്, അയോഡിൻ ലായനി, അൽകഹോൾ, സഫ്രാനിൻ
Read Explanation:
ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ്: ഒരു വിശദീകരണം
- ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ് എന്നത് ബാക്ടീരിയകളെ അവയുടെ കോശഭിത്തിയുടെ ഘടനയുടെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ രണ്ട് പ്രധാന ഗ്രൂപ്പുകളായി (ഗ്രാം പോസിറ്റീവ്, ഗ്രാം നെഗറ്റീവ്) തരംതിരിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു സുപ്രധാന ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സാങ്കേതികവിദ്യയാണ്.
- ഈ രീതി വികസിപ്പിച്ചത് ഡാനിഷ് ശാസ്ത്രജ്ഞനായ ഹാൻസ് ക്രിസ്റ്റ്യൻ ഗ്രാം (Hans Christian Gram) ആണ്, 1884-ലാണ് അദ്ദേഹം ഇത് അവതരിപ്പിച്ചത്.
- ഇത് മൈക്രോബയോളജിയിലെ ഏറ്റവും അടിസ്ഥാനപരമായ സ്റ്റെയിനിംഗ് ടെക്നിക്കുകളിൽ ഒന്നാണ്.
ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ് റീഏജൻ്റ്സിന്റെ ശരിയായ ക്രമം:
- ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ് (Crystal Violet):
- ഇതാണ് പ്രൈമറി സ്റ്റെയിൻ അഥവാ പ്രാഥമിക ചായം.
- ഇത് ബാക്ടീരിയൽ കോശങ്ങളെല്ലാം വയലറ്റ് നിറമാക്കുന്നു.
- ഗ്രാം പോസിറ്റീവ്, ഗ്രാം നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകൾ രണ്ടും ഈ ഘട്ടത്തിൽ വയലറ്റ് നിറം സ്വീകരിക്കും.
- അയോഡിൻ ലായനി (Iodine Solution):
- ഇതിനെ മോർഡൻ്റ് (Mordant) എന്നാണ് പറയുന്നത്.
- അയോഡിൻ, ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റുമായി ചേർന്ന് കോശങ്ങൾക്കുള്ളിൽ ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്-അയോഡിൻ കോംപ്ലക്സ് (Crystal Violet-Iodine complex) രൂപീകരിക്കുന്നു.
- ഇത് സ്റ്റെയിൻ കോശങ്ങളിൽ ഉറച്ചുനിൽക്കാൻ സഹായിക്കുന്നു.
- അൽക്കഹോൾ / അസെറ്റോൺ (Alcohol / Acetone):
- ഇതാണ് ഡീകലറൈസിംഗ് ഏജൻ്റ് അഥവാ നിറം കളയുന്ന പദാർത്ഥം.
- ഈ ഘട്ടമാണ് ഗ്രാം പോസിറ്റീവ്, ഗ്രാം നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകളെ വേർതിരിക്കുന്നത്.
- ഗ്രാം പോസിറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകളുടെ കട്ടിയുള്ള പെപ്റ്റിഡോഗ്ലൈക്കൻ കോശഭിത്തി ഈ കോംപ്ലക്സിനെ നിലനിർത്താൻ സഹായിക്കുന്നു, അതിനാൽ അവ വയലറ്റ് നിറത്തിൽ തന്നെ തുടരും.
- ഗ്രാം നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകളുടെ നേർത്ത പെപ്റ്റിഡോഗ്ലൈക്കൻ പാളിയും പുറം ഭിത്തിയിലുള്ള ലിപിഡുകളും ആൽക്കഹോളിൽ അലിഞ്ഞുപോകുന്നു, ഇത് കോംപ്ലക്സ് പുറത്തേക്ക് പോകുന്നതിനും അവ നിറമില്ലാത്തതാവാനും കാരണമാകുന്നു.
- സഫ്രാനിൻ (Safranin):
- ഇതാണ് കൗണ്ടർ സ്റ്റെയിൻ (Counterstain).
- ആൽക്കഹോൾ ഉപയോഗിച്ച് നിറം നഷ്ടപ്പെട്ട ഗ്രാം നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകളെ ഇത് ചുവപ്പ് അല്ലെങ്കിൽ പിങ്ക് നിറമാക്കുന്നു.
- ഗ്രാം പോസിറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകൾ വയലറ്റ് നിറത്തിൽ തന്നെ തുടരും, കാരണം അവ ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്-അയോഡിൻ കോംപ്ലക്സ് നിലനിർത്തുന്നു.
പ്രധാന വിവരങ്ങൾ:
- ഗ്രാം പോസിറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകൾ വയലറ്റ് നിറത്തിൽ കാണപ്പെടുന്നു (ഉദാ: Staphylococcus, Streptococcus).
- ഗ്രാം നെഗറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകൾ ചുവപ്പ്/പിങ്ക് നിറത്തിൽ കാണപ്പെടുന്നു (ഉദാ: E. coli, Salmonella).
- രോഗനിർണ്ണയത്തിലും ആൻ്റിബയോട്ടിക് ചികിത്സാരീതികൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നതിലും ഈ സ്റ്റെയിനിംഗ് രീതിക്ക് വലിയ പ്രാധാന്യമുണ്ട്.